多肽由氨基酸脱水缩合而成,是蛋白质的结构片段,也是涉及生物体内各种细胞功能的生物活性物质的总称。常被应用于蛋白功能分析、单抗制备、抗体-抗原相互作用、酶特异性研究,药物研发等领域。诺赛基因凭借强大的综合平台实力,可提供一站式多肽合成服务,向科研及工业用户提供高质量的定制化多肽合成制品。
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多肽合成:多通道多肽合成仪、Waters高效液相色谱系统、AB质谱仪等;定制化多肽合成服务,成功率〉98%,快速交付,免费抗原设计。
多肽修饰:除了常规线性肽之外,还可满足您对多种环肽、修饰肽和特殊肽的需求,包括同位素标记、荧光标记、生物素标记、N /C端修饰、抗原肽、环肽、PEG化和多种二硫键修饰等。
样品:交付约定合成量的多肽制品。
文件:送货单、COA文件。
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1、合成DNA溶液在室温下放置了数天,还可以使用吗?
常温下溶液中的Oligo DNA可以放置3~4天,但最好不要放置一周以上。其降解速度会受溶液中的菌体、核酸酶等的影响。
2、怎样理解测定的OD值?
进行OD值测定时,分光光度计上显示的数值为每毫升溶液中的OD值。当测定200ul溶液中的OD值为1.5时,溶液整体的OD量应该为多少?此时的OD值 = 1.5 OD/ml × 0.2 ml = 0.3 OD。
3、合成Oligo DNA应怎样保存?
保存合成的Oligo DNA应该注意以下几点:
(1)干燥制品很稳定,长期保存请放置于-20℃。
(2)溶解后的溶液DNA短期内(1~2周)使用可放置在4℃下保存,长期保存请放置于-20℃。溶解DNA时,请注意使用无菌、无核酸酶的水或TE Buffer。
(3)荧光标记引物请避光在4℃保存,长期保存请避光放置于-20℃。
4、制品溶解后发现有少许沉淀,会影响实验结果吗?
所有的制品纯化后都要进行脱盐,脱盐是使用C18柱进行的,偶尔会有微量的树脂溢出而进入制品。树脂不影响任何反应结果,请稍许离心后取上清使用。
5、PCR产物经克隆后测序发现,引物处的碱基有错误,为什么?
(1) 合成机管路的瞬时阻堵,造成化学反应的瞬间中断,其结果可能会发生单个(或部分)碱基的缺失。
(2) 计算机程序失灵,导致错误合成。
(3) 合成过程中,碱基附加至DNA片段之前,碱基和碱基之间发生了偶联,然后再附加到了DNA片段上,造成多碱基现象。
(4) 合成时碱基G可能会转化成烯醇异构体,此时进行PCR反应时G会转变成A。
(5) 合成过程中的脱嘌呤作用,对脱嘌呤后的碱基DNA聚合酶不能识别,此时可能观察到A或G的缺失。嘌呤含量越高,就越容易发生这种情况。
(6) 不完全的脱保护结果。通常C脱得快,G脱得慢。不完全脱保护会发生碱基缺失。
(7) 合成过程中的Capping(盖帽)反应不完全,使短片段DNA继续参与合成,造成碱基缺失。
上述这些情况发生的可能性都极低。然而,合成的DNA链越长,发生这种情况的概率也就越大。
6、怎样才能保证Oligo DNA的正确性?
(1) 合成Oligo DNA时,选用高纯度级制品。
(2)避免使用大于50nt的长链Oligo DNA,最好选用小于35nt的合成DNA制品。
(3) 进行克隆实验时,每次克隆都须进行测序验证,以保证序列的正确性,然后再进行进一步实验。进行蛋白表达实验时,尤其需要注意。
7、Oligo DNA最长可以合成多少个碱基?
以每步反应效率为99%进行计算,粗略计算合成到100个碱基时,目的DNA片段的比例便为0 (精确数为37.0%),要想保证合成DNA的碱基100%正确,Oligo DNA的长度最好不要超过70nt,当长度达80nt以上时,要想保证一个碱基不错就很困难了,因此合成越长的片段合成费用越高。
8、一般的合成Oligo DNA的5'和3'末端有Q吗?(Q为修饰)
没有,5'和3'末端均为-OH基。如需要加Q,订货时请特别注明,此时需收取加Q (Q修饰)的费用。